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脂肪酸酸化アッセイキット

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細胞アッセイ · 日本語

脂肪酸酸化アッセイキット

オクタノイル-CoA 基質を用いて、細胞・組織中の脂肪酸酸化(β 酸化)を 120 分未満で定量できる高感度比色アッセイ。原理・特長・応用例を日本語でまとめました。

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1脂肪酸酸化アッセイキット

Assay Genie の脂肪酸酸化アッセイキットは、細胞や組織中の脂肪酸酸化を定量測定するための高感度な比色アッセイです。オレイン酸のような長鎖・低溶解性の基質に代えて、高溶解性の基質オクタノイル-CoA を使用することで、正確な脂肪酸酸化の測定を可能にします。

図1:正常なハムスターおよびハムスター心不全モデル(TO2)の心臓から組織ライセートを調製し、脂肪酸酸化レベルを定量化。
図1:正常なハムスターおよびハムスター心不全モデル(TO2)の心臓から組織ライセートを調製し、脂肪酸酸化レベルを定量化。
アッセイコードパックサイズ
脂肪酸酸化アッセイキットBR000011× 96 アッセイ

2特長と長所

  • 直接的な結果: ユニークなオクタノイル-CoA 基質で、細胞・組織の脂肪酸酸化をシンプルに定量
  • 迅速: 120 分未満で測定
  • フレキシブル: 特別な装置は不要。プレートリーダーで 492 nm を測定
  • 使いやすい: 3 つのキットコンポーネントによるシンプルなプロトコル

3脂肪酸酸化(β 酸化)

脂肪酸酸化(脂肪酸 β 酸化)は多くの組織における主要な代謝経路であり、グルコース欠乏状態では第一のエネルギー源となります。脂肪酸は炭水化物より炭素あたり多くの ATP を生成し、心臓組織のような高エネルギー要求組織ではエネルギーの 50〜70% が β 酸化に由来します。ミトコンドリアで脂肪酸がアセチル-CoA へ変換される際に FADH2 や NADH が生成されます。

この好気的酸化経路は 4 つのステップからなります:アシル-CoA デヒドロゲナーゼによる脱水素反応、エノイル-CoA ハイドラターゼによる水和反応、3-ヒドロキシアシル-CoA デヒドロゲナーゼによる脱水素反応、そしてベータケトチオラーゼによるチオール開裂です。

4脂肪酸酸化研究の重要性

β 酸化機構の重要性は、脂肪酸酸化異常症(FAODs)という遺伝性疾患群の存在に表れています。これらは常染色体劣性遺伝で、脂肪酸の輸送・酸化に関わる遺伝子の欠損により、臨床上幅広い病態を示します。

さらに、胎児発達中の脂肪酸酸化(FAO)機能は胎児の生存に重要なだけでなく、成人期の健康や疾患にも影響します。脂肪酸酸化活性の測定は、多くの疾患の病態生理と代謝的基盤について貴重な知見を提供します。

Assay Genie の非放射性 FAO アッセイはオクタノイル-CoA 基質の酸化に基づいています。酸化で生じる NADH がテトラゾリウム塩 INT を INT-ホルマザンへ還元し、ホルマザンの赤色強度が FAO 活性の増加に比例します。

5応用例

  • 健康時・病態時の代謝経路(脂質代謝)の研究
  • シグナル伝達経路の研究
  • 脂肪酸酸化異常症(FAODs)などの遺伝性疾患の研究
  • 心血管疾患(例:心不全)の研究
  • 発達中の胎児の細胞エネルギー代謝研究
  • がん代謝における脂肪酸酸化の意義の研究
本キットは研究用試薬(RUO)であり、ヒトの疾患診断には使用できません。

7関連する日本語ガイド

実験ワークフローに役立つ、その他の日本語ガイドもあわせてご覧ください。

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