1什么是血细胞计数器

血细胞计数器是一种细胞计数室，用于确定液体样品中的细胞浓度。它由厚玻璃显微镜载玻片构成，中央刻有 4×4 的线条网格。由于网格尺寸预先确定、线条覆盖的面积已知，研究人员即可计算出特定体积溶液中的细胞数量。

细胞计数是研究中的基本环节。近年来已开发出多种自动细胞计数仪器，但血细胞计数器仍是细胞计数的黄金标准方法。

2血细胞计数器的工作原理

血细胞计数室经过精细蚀刻，划出 9 个 1 mm² 的区域，每个区域又分为 16 或 25 个大小相同的小方格（最常见的两种型号）。计数时，将专用盖玻片置于室顶，使盖玻片底面与计数室表面之间保持 0.1 mm 的间隙。因此每个 1 mm² 区域对应的体积为 1 mm² × 0.1 mm = 0.1 mm³（即 1×10⁻⁴ mL）。

当细胞置于室中时，它们会填满间隙中的可用空间；因此每个 1 mm² 区域内可见的细胞都存在于 1×10⁻⁴ mL 的体积中。这就是测量细胞密度（细胞/mL）的基本原理。

对于 1 mm² 方格，单个方格体积为 1×10⁻⁴ mL；但体积会随所选方格大小而变化。例如中央方格内的小方格用于红细胞计数——1 mm² 中央方格含 25 个小方格，故小方格体积为 1×10⁻⁴ ÷ 25 = 4×10⁻⁶ mL。

3血细胞计数器的用途

细胞密度

细胞密度对于维持健康培养、传代、建立细胞库、准备流式细胞术与 ELISA 样品，以及跟踪产量都至关重要。例如可用它将模型预测的细胞生长与培养中观察到的实际生长相匹配。

细胞活力

血细胞计数器还能提供细胞活力这一有用指标。通过在计数液中加入一种只染死细胞、不染活细胞的染料，在计数时分别记录，即可按“活细胞 / 总细胞（百分比）”计算活力。这在毒性测试中尤其有用，可了解细胞毒剂在给定时间内杀死了多少细胞。

其他用途

血细胞计数器的应用已扩展到其他领域：如在酿造过程中评估酵母的密度与质量，在蜂蜜生产中确定成品中花粉的密度。技术进步也使其发展为可用一次性计数室进行自动细胞计数、几乎即时获得结果。这种新方法对广泛的常规细胞系效果良好并大幅节省时间，但对更定制化的应用（如罕见病患者细胞）可能需要微调。

4HemocyTap 应用程序——自动细胞计数与计算

用血细胞计数器进行细胞计数往往需要多次重复、非常耗时——尤其是每天需处理 10–20 个样本、对活细胞计数并即时计算时。这正是作者读博初期作为生物实验室新人所面临的问题。

起初她像其他人一样接受训练，每天勤勉地完成 10–20 次人工计数；但后来在实验室做计算的时间甚至超过了照顾细胞的时间。她相信一定有更好的办法，于是运用工程技能开发了一款应用 HemocyTap，帮助统计细胞数量并自动完成这些日常计算。它先在自己实验室使用，随后同事们也开始使用，于是她将其上架 App Store 并陆续收到反馈。

她也意识到，围绕细胞计数这一主题存在诸多困惑——人们同样在努力理解方案与计算背后的逻辑。由于网上缺乏深入解答该主题的资源，她于 2013 年创建了 hemocytometer.org。此后网站不断更新，也收到了数百个与细胞计数及相关技术有关的问题。

了解更多细胞计数信息或下载 HemocyTap 应用，请访问 www.hemocytometer.org；如需了解作者 Maria 或在领英联系，请点击这里。