101 Dicas para Solução de Problemas do ELISA
101 dicas de resolução de problemas em ELISA
Resolva rapidamente os seis problemas mais comuns do ELISA. Pesquise 101 dicas de especialistas sobre sinal elevado, resultados fora do intervalo, variação elevada, sinal de fundo elevado, ausência de sinal e curvas padrão deficientes.
Otimize e resolva os problemas do seu ELISA
Eliminar erros comuns pode melhorar drasticamente a sensibilidade e a reprodutibilidade do seu ELISA. Este guia abrange as seis áreas onde os investigadores mais frequentemente encontram problemas.
As 101 dicas
Filtre por área problemática ou pesquise por sintoma, causa ou solução (por exemplo, “lavagem”, “sinal de fundo”, “curva padrão”).
Explore kits e serviços de ELISA
Kits de ELISA validados e prontos a usar, e desenvolvimento personalizado para obter dados fiáveis desde o início.
Kits de ELISA
Milhares de kits de ELISA sandwich e competitivos validados para humano, ratinho e rato.
→Kits de ELISA para Citocinas
ELISAs de citocinas e quimiocinas de elevada sensibilidade para investigação em imunologia.
→ELISA Multiplex
Meça vários analitos por amostra com os ensaios multiplex GeniePlex.
→Kits de ELISA à Base de Células
Quantifique proteínas totais e fosfoproteínas diretamente em células fixadas.
→Kits de ELISA para Segurança Alimentar
ELISAs de micotoxinas, alérgenos e contaminantes para análise de alimentos.
→Serviço de ELISA Personalizado
Desenvolvimento à medida de kits de ELISA sandwich e competitivos para o seu alvo.
→Perguntas frequentes sobre resolução de problemas em ELISA
O que causa sinal elevado num ELISA?
O sinal elevado e os falsos positivos resultam normalmente de lavagem insuficiente da placa, ausência de paragem da reação, excesso de reagente de deteção, substrato contaminado ou bloqueio ineficaz.
Porque é que os meus resultados de ELISA estão fora do intervalo?
Os valores fora do intervalo ocorrem quando o analito está abaixo ou acima da curva padrão, ou devido a lavagem insuficiente e diluições incorretas. Dilua ou concentre as amostras e verifique novamente os cálculos de diluição.
Como reduzo a variação elevada (CVs elevados) num ELISA?
A variação elevada resulta de erros de pipetagem, amostras não homogéneas, lavagem ou agitação irregular, efeitos de bordo e placas sujas. Calibre as pipetas, misture as amostras, agite uniformemente e equilibre os reagentes à temperatura ambiente.
Porque é que o sinal de fundo do meu ELISA está elevado?
O sinal de fundo elevado é causado por lavagem inadequada, reatividade cruzada, ligação não específica, excesso de reagente de deteção ou bloqueio ineficaz. Aumente as lavagens, otimize o bloqueio e titule os anticorpos.
Porque é que não há sinal no meu ELISA?
A ausência de sinal pode resultar de um anticorpo de deteção ou avidin-HRP em falta, azida no tampão de lavagem, alvo abaixo do limite de deteção, incubação curta ou reagentes que não estão à temperatura ambiente.
O que causa uma curva padrão deficiente num ELISA?
Uma curva padrão deficiente resulta de um padrão degradado ou mal reconstituído, erros de pipetagem, mistura deficiente, aspiração incompleta ou um ajuste de curva inadequado. Refaça a curva e verifique os cálculos.
Ainda com dificuldades no seu ELISA?
A nossa equipa técnica de nível PhD pode ajudá-lo a diagnosticar o problema e a pôr o seu ensaio a funcionar.