101 sugerencias para solucionar problemas de ELISA
101 consejos para la resolución de problemas en ELISA
Solucione rápidamente los seis problemas más frecuentes del ELISA. Busque entre 101 consejos de expertos sobre señal alta, resultados fuera de rango, variación alta, fondo alto, ausencia de señal y curvas patrón deficientes.
Optimice y resuelva los problemas de su ELISA
Eliminar los errores más comunes puede mejorar notablemente la sensibilidad y la reproducibilidad de su ELISA. Esta guía abarca las seis áreas en las que los investigadores encuentran problemas con mayor frecuencia.
Los 101 consejos
Filtre por área problemática o busque por síntoma, causa o solución (p. ej., «lavado», «fondo», «curva patrón»).
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→Preguntas frecuentes sobre la resolución de problemas en ELISA
¿Qué causa una señal alta en un ELISA?
La señal alta y los falsos positivos suelen deberse a un lavado insuficiente de la placa, a no detener la reacción, a un exceso de reactivo de detección, a un sustrato contaminado o a un bloqueo ineficaz.
¿Por qué mis resultados de ELISA están fuera de rango?
Los valores fuera de rango se producen cuando el analito está por debajo o por encima de la curva patrón, o por un lavado insuficiente y diluciones incorrectas. Diluya o concentre las muestras y vuelva a comprobar los cálculos de dilución.
¿Cómo reduzco la variación alta (CV altos) en un ELISA?
La variación alta se debe a errores de pipeteo, muestras no homogéneas, lavado o agitación desiguales, efectos de borde y placas sucias. Calibre las pipetas, mezcle las muestras, agite de manera uniforme y equilibre los reactivos a temperatura ambiente.
¿Por qué el fondo de mi ELISA es alto?
El fondo alto se debe a un lavado inadecuado, reactividad cruzada, unión inespecífica, exceso de reactivo de detección o un bloqueo ineficaz. Aumente los lavados, optimice el bloqueo y titule los anticuerpos.
¿Por qué no hay señal en mi ELISA?
La ausencia de señal puede deberse a la falta del anticuerpo de detección o de la avidin-HRP, a la presencia de azida en el tampón de lavado, a una diana por debajo del límite de detección, a una incubación corta o a reactivos que no están a temperatura ambiente.
¿Qué causa una curva patrón deficiente en un ELISA?
Una curva patrón deficiente se debe a un patrón degradado o mal reconstituido, a errores de pipeteo, a una mezcla deficiente, a una aspiración incompleta o a un ajuste de curva inadecuado. Rehaga la curva y compruebe los cálculos.
¿Aún tiene problemas con su ELISA?
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