அதிக சிக்னல் மற்றும் தவறான நேர்மறைகள் பொதுவாக போதிய தட்டு கழுவல் இல்லாமை, வினையை நிறுத்தாமை, அதிக கண்டறிதல் காரணி, மாசுபட்ட அடிமூலக்கூறு அல்லது பயனற்ற தடுப்பு ஆகியவற்றால் ஏற்படுகின்றன.

அனலைட் தர வளைவுக்குக் கீழே அல்லது மேலே இருக்கும்போது, அல்லது போதிய கழுவல் இல்லாமை மற்றும் தவறான நீர்த்தல்களால் வரம்பிற்கு வெளியேயான மதிப்புகள் ஏற்படுகின்றன. மாதிரிகளை நீர்த்துங்கள் அல்லது செறிவூட்டுங்கள், மேலும் உங்கள் நீர்த்தல் கணக்கீடுகளை மறுபரிசோதனை செய்யுங்கள்.

பிப்பெட்டிங் பிழைகள், ஒத்திசைவற்ற மாதிரிகள், சீரற்ற கழுவல் அல்லது கிளறல், விளிம்பு விளைவுகள் மற்றும் அழுக்கு தட்டுகளிலிருந்து அதிக மாறுபாடு ஏற்படுகிறது. பிப்பெட்டுகளை அளவீடு செய்யுங்கள், மாதிரிகளைக் கலக்குங்கள், சீராகக் கிளறுங்கள், மேலும் காரணிகளை அறை வெப்பநிலைக்கு சமநிலைப்படுத்துங்கள்.

போதிய கழுவல் இல்லாமை, குறுக்கு-வினைத்திறன், குறிப்பிட்ட-அல்லாத பிணைப்பு, அதிக கண்டறிதல் காரணி அல்லது பயனற்ற தடுப்பால் அதிக பின்னணி ஏற்படுகிறது. கழுவல்களை அதிகரிக்கவும், தடுப்பை மேம்படுத்தவும், மேலும் ஆன்டிபாடிகளைத் திட்ரேட் செய்யவும்.

காணாமல் போன கண்டறிதல் ஆன்டிபாடி அல்லது avidin-HRP, கழுவல் இடையகத்தில் அசைடு, கண்டறிதல் வரம்பிற்குக் கீழேயான இலக்கு, குறுகிய அடைகாத்தல், அல்லது அறை வெப்பநிலையில் இல்லாத காரணிகள் ஆகியவற்றால் சிக்னல் இல்லாமல் இருக்கலாம்.

சிதைந்த அல்லது மோசமாக மீட்டமைக்கப்பட்ட தரநிலை, பிப்பெட்டிங் பிழைகள், மோசமான கலத்தல், முழுமையற்ற உறிஞ்சல் அல்லது பொருத்தமற்ற வளைவு பொருத்தத்தால் மோசமான தர வளைவு ஏற்படுகிறது. வளைவை மீண்டும் உருவாக்கி கணக்கீடுகளைச் சரிபார்க்கவும்.