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Cómo eliminar endotoxinas de proteínas recombinantes sin perder actividad biológica La forma más fiable de obtener proteínas recombinantes con niveles seguros de endotoxina es combinar medidas upstream (cepas y condiciones de expresión de baja carga de LPS) con al menos dos pasos downstream ortogonales, como Triton X-114, cromatografía de intercambio aniónico, IMAC con lavado detergente o Polymyxin B, que sumados alcancen entre 4 y 6 log de reducción. Cada paso debe verificarse con LAL o rFC y presupuestarse contra la pérdida de proteína funcional. En resumen: Se requiere combinar medidas upstream con al menos dos pasos downstream que logren una reducción total de 4 a 6 logaritmos de end …