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TMB-Substrat im ELISA: Chemie, Protokoll und Fehlerquellen TMB ist das Standardchromogen für HRP-ELISA und liefert nach Oxidation ein blaues Reaktionsprodukt, das sich nach dem Säurestopp bei 450 nm messen lässt. Die drei Parameter, die über ein brauchbares Signal entscheiden, sind das Volumen pro Well, die Inkubationszeit und der Zeitpunkt der Stoppreaktion. Gebrauchsfertige Formulierungen machen die Handhabung dabei denkbar einfach. Kurz gesagt: Ein zu langes Inkubationsfenster oder unzureichende Waschschritte können das Signal überentwickeln und zu trüben oder zu dunklen Resultaten führen. Kristallbildung bei hohen HRP-Konzentrationen verfälscht die Messergebnisse und erfordert Verdün …